备考2018年高考生物——实验探究专题：专题20 DNA的粗提取与鉴定_试卷库

备考2018年高考生物——实验探究专题：专题20 DNA的粗提取与鉴定

年级：学科：生物学类型：来源：91题库

一、单选题（共11小题）

1、若选择的实验材料为植物细胞，破碎细胞时要加入一定量的洗涤剂和食盐．加入食盐的目的是（）

A . 利于DNA的溶解 B . 分离DNA和蛋白质 C . 溶解细胞膜 D . 溶解蛋白质

2、下列有关用鸡血进行DNA粗提取和鉴定实验的操作，错误的是（　　）

A . 鸡血细胞中加入蒸馏水后，用玻璃棒搅拌 B . 用蛋白酶纯化溶解于2mol/LNaCl溶液中的DNA C . 在溶有DNA的滤液中加入体积分数为95%的冷酒精后，用玻璃棒轻缓搅拌 D . 将卷在玻璃棒上的丝状物加入到4mL二苯胺试剂中，沸水浴加热，冷却后观察

3、向溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液中不断加入蒸馏水，在这个过程中DNA和杂质蛋白质的溶解度变化情况分别是（）

A . 减少、减少 B . 增大、增大 C . 先减小后增大、增大 D . 减小、增大

4、由于实验材料用品所限，有时候需要设法替代，下列各项中正确的是（）

A . 做DNA粗提取和鉴定实验时，可用新鲜猪血代替鸡血 B . 做植物细胞质壁分离和复原实验时，可用15%的HCl溶液代替30%的蔗糖溶液 C . 做还原糖的鉴定实验时，可用胡萝卜代替苹果 D . 做叶绿体色素提取和分离实验时，可用丙酮代替无水乙醇

5、在DNA粗提取与鉴定实验中，将过滤获得的纱布上含有的DNA的黏稠物（含有较多杂质）分别处理如表：

序号	操作过程
①	放入2mol/L的NaCl溶液，搅拌后过滤
②	再加0.14mol/L的NaCl溶液，搅拌后过滤
③	再加入冷却的、同体积的95%酒精溶液，用玻璃棒沿着一个方向搅拌，卷起丝状物

上述操作过程正确的是（）

A . ①② B . ①②③ C . ①③ D . ②③

6、在DNA粗提取与鉴定实验中，将获得的含有DNA的黏稠物分别按下表处理3次，则DNA主要集中在标号（　　）

操作	粘稠物	滤液
2mol/L的NaCl溶液搅拌过滤	①	②
0.14mol/L的NaCl溶液搅拌过滤	③	④
95%的冷酒精搅拌过滤	⑤	⑥

A . ①③⑤ B . ②③⑤ C . ①④⑥ D . ②④⑥

7、如图是“DNA粗提取与鉴定”实验中的两个操作步骤示意图，相关叙述正确的是（　　）

A . 图1中溶液a是0.14 mol•L^﹣1的NaCl溶液 B . 图1所示操作的原理是DNA能溶于酒精，而蛋白质等杂质不溶 C . 图2所示实验操作中有一处明显错误，可能导致试管2中蓝色变化不明显 D . 图2试管1的作用是证明2 mol•L^﹣1 NaCl溶液遇二苯胺出现蓝色

8、“DNA的粗提取和鉴定”实验原理的叙述，正确的是（　　）

A . 利用NaCl在不同浓度的DNA溶液中的溶解度不同 B . 利用DNA不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯净的DNA C . DNA是大分子有机物，不溶于水而溶于某些有机溶剂 D . 在沸水中，DNA遇二苯胺会出现紫色反应

9、下列关于“DNA的粗提取”实验的叙述中，正确的是（　　）

A . 常温下香蕉匀浆中有些酶会影响DNA的提取 B . 洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度 C . 向鸡血细胞悬液中加入蒸馏水后，用玻璃棒轻轻缓慢搅拌 D . 使用鸡血细胞悬液为材料的操作中，两次加入2 mol/L的NaCl溶液，目的不同

10、下列有关“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是（　　）

A . 随NaCl溶液浓度增大，DNA的溶解度逐渐增大 B . 新鲜的猪血细胞是用于DNA粗提取的理想材料 C . 在酒精溶液中，某些蛋白质的溶解度大于DNA的溶解度 D . 在50～60℃水浴中，DNA遇二苯胺试剂后即呈蓝色

二、实验探究题（共4小题）

1、萝卜贮藏根组织细胞中是否存在蛋白质和DNA？某生物小组对此进行了研究．他们查阅了有关资料得知：①蛋白质在l0%Nacl溶液中可沉淀析出；②在蛋白质溶液中，加入双缩脲试剂，溶液呈现特有的颜色；③DNA溶于10%NaCl溶液，但在95%酒精中呈白色絮状沉淀析出．

实验材料：白萝卜．

实验用具：粉碎机、烧杯、漏斗、试管、滤纸、玻棒、镊子、载玻片、天平、纱布．

实验药品及试剂：蒸馏水、NaCl、95%酒精、甲基绿染液（遇DNA呈蓝绿色）、双缩脲

试剂、蛋白质标准样品．

请你根据所提供的条件参与实验设计并回答问题：

(1)材料处理：称取50g 洗净切块，加水30mL，用粉碎机粉碎，将匀浆经纱布过滤．

(2)提取：

①向经纱布过滤得到的滤液中加入，直至沉淀析出．经滤纸过滤，将滤纸上的沉淀物放入试管中，加入1mL蒸馏水，振荡，用于鉴定．

②除去蛋白质的滤液中，加入，用玻棒轻轻搅拌，有白色絮状沉淀产生．

经滤纸过滤，用镊子将滤纸上的絮状沉淀置于载玻片，用于鉴定．

(3)鉴定及结果：

①在用于蛋白质鉴定的试管中，加入双缩脲试剂，产生紫色反应；同时将和1mL蒸馏水放入另一试管，加入双缩脲试剂，产生紫色反应．观察到两支试管中颜色基本一致，说明．

②在用于DNA鉴定的载玻片上，滴加甲基绿染液，白色絮状沉淀呈现蓝绿色，说明．

③通过对白萝卜贮藏根匀浆液的检测，说明．

2、如图为DNA粗提取过程中的一些重要操作，请据图回答下列问题．

(1)正确的操作顺序是．

(2)C、E步骤都加入蒸馏水，但其目的不同，分别是和．

(3)A步骤中所用酒精必须经过才能使用，该步骤的目的是．

3、为了获得较多、较纯、较完整的甜菜总DNA，科研人员比较了A方法（通过CTAB裂解细胞，并与蛋白质形成复合物）、B方法（通过SDS裂解细胞释放核DNA，使蛋白质变性）、C方法（通过高盐沉淀蛋白质）从嫩叶、块根中提取总DNA的效果，主要实验步骤和相关检测结果如下，其中氯仿﹣异戊醇不溶于水且密度均大于水，DNA不溶于氯仿﹣异戊醇，蛋白质等溶于氯仿﹣异戊醇．分析回答：

①将液氮冷冻的组织研磨成粉末

↓

②分别用A、B、C三种不同方法处理

↓

③DNA粗提液在65℃水浴保温60min，搅拌均匀

↓

④加氯仿﹣异戊醇，离心取？，加冷酒精，收集沉淀

↓

⑤加入RNA酶，37℃水浴保温20min，重复步骤④

↓

⑥将沉淀室温干燥后，溶于超纯水中，﹣20℃保存备用

结果检测

组织	方法	组别	OD₂₆₀/OD₂₃₀	OD₂₆₀/OD₂₈₀	得率/μg•mg^﹣1
嫩叶	A方法	A1	1.970	1.821	0.105
	B方法	B1	1.973	1.719	0.096
	C方法	Cl	1.647	1.568	0.082
块根	A方法	A2	1.888	1.888	0.029
	B方法	B2	1.811	1.682	0.030
	C方法	C2	1.376	1.320	0.020

注：①纯净的DNA样品OD₂₆₀/OD₂₃₀值约为2.0，过低表明小分子物质残留较多；②纯净的DNA样品OD₂₆₀/OD₂₈₀值约为1.8，若比值大于1.8表示存在RNA残留，若小于1.8表示存在蛋白质残留．③得率是指每毫克组织所提取的DNA量．

(1)步骤③将DNA粗提液在65℃水浴保温60min的目的是．步骤④“？”表示．步骤⑤中加RNA酶的作用是．

(2)影响DNA纯度的物质主要有．提取的DNA中RNA残留较多的方法是．为材料提取DNA的得率较高，原因是．

(3)电泳可以直观对比DNA的完整性，分子大小不同的DNA在凝胶上迁移速率不同，从而产生不同的条带．如图是上述实验中提取到的总DNA 凝胶电泳结果，其中M是已知大小的不同DNA的混合物．实验结果显示A、B方法提取的总DNA电泳结果只有一条带，而C方法有明显的“拖尾”现象．

①只出现一条带的原因是．

②出现“拖尾”现象的原因是．

4、真核生物细胞内，大量DNA和蛋白质以及一些RNA等混杂在一起，难以分离．生物兴趣小组的同学为了获得纯度相对较高的DNA展开了实验探究．

(1)分离各种物质的基本思路是根据DNA和其他物质理化性质的不同而采取一定的方法，如图是从各种物质之间的差异角度开展研究：

a、取鸡血细胞悬液10mL，加蒸馏水20mL，同时用玻璃棒（填“轻轻搅拌”或填“快速搅拌”）．过滤，取滤液，转移到塑料材质的大烧杯中．

b、沿大烧杯内壁持续、缓慢地加入饱和硫酸铵溶液，用玻棒沿一个方向（填“轻轻搅拌”或填“快速搅拌”），同时不断收集析出的物质．

如图是根据鸡血中几种物质的析出情况绘制的曲线，请据图分析：

c、如果只要收集纤维蛋白，可采取的措施是．

d、先用饱和度40%的硫酸铵溶液析出绝大部分纤维蛋白和大部分球蛋白，再在饱和度约为的硫酸铵溶液中析出DNA（既保证DNA提取量较大又避免其他杂质过多），与此同时析出的物质还有．

(2)如果要进一步去掉其他杂质，尽可能提高获得的DNA纯度，可采取的两种办法有：将DNA与球蛋白的混合物加入到中，收集再次析出物；用处理溶有DNA与蛋白质的溶液．